超声波提取法可提高黄酮的得率的实验

超声波法提取柿叶总黄酮。工艺流程：柿叶y粉碎y乙醇浸泡y超声处理y离心y定容y测定。单因素实验。1乙醇浓度对超声波提取效果的影响。准确称取柿叶粗粉2.0g，共6份，按料液比1B25，分别加入40、50、60、70、80、90的乙醇，浸泡1 h，超声提取30 min，提取液离心（4 000 r/min）10 min，用少量70乙醇洗涤药渣后，离心5 min.合并离心液置100 ml容量瓶，加乙醇溶液定容，取0. 5 ml提取液按/1. 2. 20方法进行显色反应，在510 nm处测定吸光值。o料液比对超声波提取效果的影响。准确称取柿叶粗粉2. 000 g，共4份，按料液比1B10，1B15， 1B20， 1B25分别加入70乙醇，以下操作同1.？提取时间对超声波提取效果的影响。准确称取柿叶粗粉2. 000 g，共4份，料液比1B25，浸泡1 h后按选择的提取时间15、30、45、60 min进行超声提取，以下操作同1.正交实验。根据以上单因素实验结果，选择对实验影响较大的3个因素各设置3水平，采用L 9（3 3）正交实验，以确定柿叶总黄酮物质的佳提取条件。常规回流法提取柿叶总黄酮测定吸光值为0. 092，经计算得总黄酮得率为2. 00。

　　超声波提取法单因素实验结果：乙醇浓度对超声波提取的影响。表明，随乙醇浓度的增大，柿叶总黄酮的提取率也随之增高；当乙醇浓度超过60时，随乙醇浓度的增高，柿叶总黄酮的提取率反而下降。这可能是由于随乙醇浓度的增大，提取液中除黄酮外的其他物质的提取率也随之提高，从而影响黄酮类物质的提取，造成柿叶总黄酮的提取率下降。料液比对超声波提取的影响。由可知，柿叶总黄酮提取率随料液比的增大而迅速增大；当料液比达到1B20时，总黄酮提取率的增加幅度明显减缓。

　　提取时间对超声波法提取的影响。由可知，总黄酮提取率随超声时间的增加而呈上升趋势，但增加的趋势不很明显，特别是当提取时间达到45 min以上时，提取率基本无变化。料液比对超声波提取的影响提取时间对超声波提取的影响2. 3正交实验结果正交实验表明（， 2），影响柿叶黄酮类化合物提取率因素的顺序为： B（料液比）> C（提取时间） > A（乙醇浓度） ，即料液比是影响柿叶总黄酮提取率的重要因素。从平均提取得率K值来看，以提取条件A 3 B 3 C 3为佳提取工艺，即乙醇浓度60 ，超声45 min，料液比1：25。

　　正交实验结果实验号乙醇浓度A料液比B提取时间C空白总黄酮得率M 1 1. 443 2 1 2 1. 636 3 1 3 3. 042 4 2 1 2 3 2. 137 5 2 3 2 1. 771 6 2 3 1 2. 156 7 3 1 3 2 2. 811 8 3 2 3 2. 386 9 3 1 2. 464 K 1 2.040 2.130 2. 021 - K 2 2.021 1.925 2. 047 2. 073 - K 3 2.541 2.554 2. 541 2. 516 - R 0.520 0.529 0. 520 0. 495 - 2. 4验证实验称取柿叶干粉2. 000 g，以料液比1B25加入60的乙醇，浸泡1 h，进行超声波提取45 min，提取液离心（4 000 r/min）10 min，用少量70乙醇洗涤药渣后，再次5 min.合并离心液置100 ml容量瓶，加乙醇溶液定容。取0. 5ml提取液按/1. 2. 20项进行显色反应，在510 nm处测吸光值OD= 0. 172，柿叶总黄酮得率为3. 54，与正交实验分析结果相符。

　　超声波提取法与常规回流法比较由可知，超声波法柿叶总黄酮的提取得率提高77，缩短提取时间195 min，料液比（提取溶剂用量）降低一半。

　　超声波提取法与常规回流提取法情况对比提取方法时间Mmin料液比提取率M常规回流法240 1B55 2. 00超声波提取法45 1B25 超声波提取柿叶黄酮的佳工艺条件是A 3 B 3 C 3，即乙醇浓度60，超声时间45 min，料液比1B25.与常规回流法相比，超声波提取法可提高柿叶总黄酮得率77 ，并且可大幅度缩短提取时间，降低提取溶剂的用量。因此，超声波提取法具有提取效率高、成本低的明显优势。