超声波帮辅纯化新式叶体内的酮物材

　　实验方法原料处理旱柳树落叶颜色鲜绿，其中含有较多的叶绿素等脂溶性色素。脂溶性色素易溶于乙醇，在利用乙醇提取总黄酮时，会有较多的叶绿素作为杂质同时被提取出来，影响了总黄酮的纯度。叶绿素等脂溶性色素在氯仿中的溶解度较高而总黄酮在其中的溶解度却很低，利用氯仿为溶剂连续回流提取以去除柳树叶中的叶绿素等脂溶性色素，同时保留其中的总黄酮。将氯仿处理后的旱柳树叶粉末挥干溶剂，作为提取总黄酮的原料。取该原料3份，每份0.5g，经100e烘至质量恒定，计算其平均含水率为4.36.

　　乙醇提取法称取原料若干份，每份0.3g，加入一定量60（质量分数，下同）乙醇，加热回流提取，提取液过滤，滤渣重复提取13次，合并滤液，稀释并定容至50mL，待测。超声波辅助乙醇提取法称取原料若干份，每份0.3g，加入一定量60乙醇，放入超声细胞内，超声波功率100500W，超声波辅助提取，提取液过滤，滤渣重复提取13次，合并滤液，稀释并定容至50mL，待测。

　　标准曲线的绘制精密移取0.2g/L的芦丁标准液0、1、2、3、4和5mL，分别置于10mL的容量瓶中，各加30的乙醇至5mL，然后分别加入5NaNO3溶液0.3mL，摇匀，放置6min，各加10的Al（NO3）3溶液0.3mL，摇匀，放置6min，再各加1mol/L的NaOH溶液4mL，后分别用蒸馏水稀释至10mL，摇匀，放置15min，在510nm测定吸光度<7>.以质量浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线，得线性方程：y=0.9045x-0.01，R2=0.9982，。

　　总黄酮的测定利用硝酸铝显色反应定性、定量分析了原料旱柳落叶中的总黄酮，方法同1.2.4节。结果显色反应出现血红色，证明总黄酮的存在。经计算，处理后旱柳落叶中总黄酮的含量为5.12（以芦丁计）。经醇提后的样品中总黄酮的测定：移取滤液1mL，然后进行显色反应<8>，测定吸光度。总黄酮得率（Y）计算如下：Y=（总黄酮质量/柳叶质量）@100正交试验在单因素试验中，研究了乙醇质量分数、料液比、提取时间、提取温度和提取次数对提取效果的影响。确定了提取剂乙醇质量分数为60，同时确定了料液比、提取时间、提取温度和提取次数等条件的适宜范围。在此基础上进行正交试验来确定优提取条件，正交试验设计及结果见。

　　超声波功率增加吸光度增大，达到300W时，吸光度达到大，继续增加超声波功率，吸光度基本不变。由于超声波的强烈振动，击碎了柳叶内部细胞壁，加快了细胞内部有效成分即总黄酮的浸出速率，因此吸光度逐渐增大。当超声波功率达到300W时，原料中的总黄酮已被提取得很充分，吸光度达到大。当超声波功率继续提高，超声波的作用使柳树叶粒度过小，尽管粒度减小有利于总黄酮的提出，但会使总黄酮损失过多同时也加剧了柳叶粉末对总黄酮的吸附，因此总黄酮的得率不再增加。从节省能源的角度考虑，利用300W超声波来辅助提取是比较适宜的。

　　超声波提取时间的影响超声波功率为300W，不同提取时间条件下各提取1次。随着超声波辅助提取时间的增加，吸光度也不断增大，时间达30min，原料在超声波作用下的提取已达到平衡状态，吸光度达到大；继续延长超声波辅助提取时间，吸光度稍有减少但变化幅度不大。此时已无法打破达到的平衡状态，反而会把原料废渣击得更碎，粒度更小，使吸附和过滤损失加大。因此，确定超声波辅助提取的时间为30min较为合适。