超声波萃取新型菊花色谱的技艺

　　色素提取正交试验设计：按照正交试验设计L9（34），将单因素试验中优选的提取条件即温度、功率、时间、物料比，4个因素分成3个水平，综合考察超声对提取切花菊花红色素的影响。

　　吸光度值测定：根据朗伯-比尔定律A=Ebc，即A=Kc，以全光谱800200nm扫描，以实验测定的大吸收波长531nm（pH<3）下的吸光度A531来代表色素提取液的浓度。A越大，表明色素提取率越高。本研究中各测值均为2次超声提取测定结果的平均值。分光光度计测试中以蒸馏水作为空白对照，在其可见光区的大吸收波长下，用1cm比色皿测其吸光度A值。

　　由测得的数据可知，菊红色素溶液在乙醇溶液中的吸光度比在乙醇-盐酸溶液中的吸光度小很多。因此，佳的提取溶剂中应加入一定体积的盐酸，因为酸性溶剂在破坏植物细胞膜的同时，还溶解水溶性的色素，所以提取率会高。

　　提取溶剂的选择溶剂溶解性吸光度溶剂溶解性吸光度蒸馏水溶解1.10330乙醇HCL溶解2.21830乙醇溶解0.81550乙醇HCL溶解2.38450乙醇溶解0.65070乙醇HCL溶解2.62270乙醇溶解0.53395乙醇HCL微溶）95乙醇不溶）丙酮不溶）注：酸溶液浓度为0.1molL-1盐酸。

　　不同醇酸体积比的选择：准确称取6份菊花粉末各1g，加入20mL质量分数分别为30、40、50、60、70、80的无水乙醇和浓度为0.1molL-1的盐酸提取剂，在温度40e，功率为250W，时间为30min的提取条件下进行超声提取。随着乙醇质量分数的增加，所对应的吸光度分别为1.245、1.268、1.343、1.447、1.542、0.575，其中，70的乙醇-盐酸溶液的提取率高，但超过70以后提取率明显下降。

　　温度的选择：准确称取5份菊花粉末各1g，加入20mL的70乙醇和浓度0.1molL-1HCl溶液，分别在温度为30、40、50、60、70e，功率为250W，时间为30min提取条件下进行超声提取。随着温度的升高，提取率随之增加，所对应的吸光度分别为1.244、1.478、1.746、1.966、1.960，但是当温度超过60e以后，抽滤的液体出现混浊现象，而且温度过高会导致红色素分解。

　　正交试验按照正交设计L9（34）。将单因素试验中优选的提取条件设为超声水浴温度、超声功率、超声提取时间和物料比4个因素分成3个水平，考察对超声提取花青素的影响，根据吸光度比较提取效果。

　　结论通过以上试验分析，对切花菊红色素提取溶剂的选择确定为质量分数为70乙醇和浓度为0.1molL-1盐酸溶液；在对温度选择时吸光度值随着温度的升高而增加，但是因为花青素类物质容易分解，所以要控制好提取时的温度，不宜太高，不能超过60e；在对时间选择时，超生提取时间过长反而会影响色素的提取率，当时间在30min时吸光值大；在物料比选择时，总的趋势是吸光值随着加入提取溶剂的增多而变大，这说明溶剂的增加使切花菊红色素溶解的更充分，但是考虑到节省原料的因素，好选择合适的物料比为1B30.